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          • 技術文章ARTICLE

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            呼(hu)吸代(dai)謝(xie)測量(liang)技(ji)術與農(nong)作物病(bing)蟲害科(ke)學(xue)防(fang)治

            發布時間(jian): 2020-07-30  點擊次數: 1978次

            人(ren)類(lei)活動的(de)化(hua)和氣候的(de)變(bian)化(hua)使(shi)得病蟲害的(de)爆發及(ji)傳(chuan)播(bo)愈(yu)發頻(pin)繁(fan)和快(kuai)速。作物病(bing)蟲害肆虐(nue)的(de)地(di)域(yu)不(bu)斷擴散,造成壹些(xie)發展中國家(jia)的(de)農(nong)作物和糧食安(an)全面臨(lin)巨大(da)風險(xian)。近年來(lai)國(guo)外(wai)的(de)壹(yi)些(xie)入侵害蟲如(ru)草(cao)地(di)貪夜蛾等引發的(de)蟲口奪(duo)糧戰引起國務(wu)院高(gao)度(du)重(zhong)視(shi)。害蟲防治(zhi)過(guo)程中無論是(shi)采(cai)用(yong)生態控制、化(hua)學(xue)滅(mie)殺還(hai)是(shi)基(ji)因(yin)編(bian)輯(ji)技術控制其種(zhong)群數量(liang),都需(xu)要(yao)實(shi)時監測害(hai)蟲生理(li)過(guo)程(cheng)(呼(hu)吸代(dai)謝(xie)),進而開(kai)發出先(xian)進的(de)害(hai)蟲管理(li)方法。

            由北京(jing)易(yi)科泰生態技術有限公(gong)司(si)提供(gong)的(de)昆(kun)蟲呼(hu)吸代(dai)謝(xie)測量(liang)技(ji)術主(zhu)要(yao)由三氣(氧氣、二(er)氧化(hua)碳(tan)、水(shui)汽)分析(xi)儀(yi)、八通道氣路(lu)轉換(huan)器、數據(ju)采集(ji)器、呼(hu)吸室、活動檢(jian)測器、標(biao)準(zhun)或(huo)高(gao)級(ji)版軟件等(deng)組(zu)成,可以連(lian)接(jie)8或16個或(huo)更(geng)多(duo)呼(hu)吸室進行(xing)昆(kun)蟲的(de)活動與(yu)呼(hu)吸代(dai)謝(xie)測量(liang)實(shi)驗。下(xia)面將(jiang)介紹(shao)壹些(xie)典(dian)型應用(yong)研究(jiu)案(an)例(li):

            案(an)例(li)壹(yi)玉(yu)米象(xiang)

            Guedes R N C , Oliveira E E , Guedes N M P , et al. Cost and mitigation of insecticide resistance in the maize weevil, Sitophilus zeamais[J]. Physiological Entomology, 2006, 31(1):30-38.

            殺蟲劑(ji)耐(nai)藥(yao)性(xing)研究(jiu)不僅(jin)在害(hai)蟲管理(li)方案(an)中具(ju)有實際(ji)重(zhong)要(yao)性,而且作為(wei)新(xin)適應(ying)的(de)表(biao)型及(ji)其相關(guan)的(de)生理(li)(和遺(yi)傳(chuan))變(bian)化(hua)的(de)進化(hua)模(mo)型也很(hen)重(zhong)要(yao)。氧氣消耗(hao)代(dai)表(biao)了昆蟲生理(li)過(guo)程(cheng)能量(liang)需(xu)求(qiu),可通過(guo)昆蟲的(de)呼(hu)吸速率(lv)來證明(ming)昆(kun)蟲種群對不(bu)同環境(jing)條件(jian)的(de)適(shi)應性。昆蟲呼(hu)吸速率(lv)的(de)變(bian)化(hua)有助於檢(jian)測與(yu)無殺蟲劑(ji)環境(jing)中的(de)殺蟲劑(ji)耐(nai)藥(yao)性(xing)相關(guan)的(de)可能適應成本,以(yi)及(ji)在接(jie)觸有毒(du)化(hua)合(he)物時,生物體(ti)脂(zhi)肪(fang)體(ti)形(xing)態(tai)能量(liang)儲(chu)備的(de)可用性(xing)和動(dong)員(yuan)力(li)。

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            本(ben)研究(jiu)結(jie)果(guo)表(biao)明(ming)玉(yu)米象(xiang)種(zhong)群殺蟲劑(ji)抗性(xing)與(yu)脂(zhi)肪(fang)體(ti)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)及(ji)呼(hu)吸頻(pin)率(lv)之間(jian)存在相關(guan)性(xing),導(dao)致(zhi)更(geng)高(gao)的(de)儲(chu)存能量(liang)隨(sui)時動員(yuan)起來抵抗殺蟲劑(ji)。此(ci)外(wai),抗(kang)殺蟲劑(ji)的(de)高(gao)能源需(xu)求(qiu)可能會帶(dai)來額外(wai)的(de)能源成本,從而(er)阻(zu)止(zhi)缺(que)乏(fa)壹(yi)個殺蟲劑(ji)的(de)抗(kang)性表型固化(hua),除(chu)非(fei)其儲(chu)存(cun)能量(liang)的(de)能力(li)動(dong)員(yuan)他(ta)們(men)的(de)力(li)量(liang)足(zu)以滿(man)足潛在的(de)相互沖(chong)突(tu)的(de)生理(li)過(guo)程(cheng)需(xu)求(qiu)(如(ru)抗(kang)藥(yao)性(xing)和發育)。另外(wai)的(de)研究(jiu)見

            Eugênio E.Oliveira,R N C.Guedes, Marcos R.Tótola, PauloDe MarcoJr. Competition between insecticide-susceptible and -resistant populations of the maize weevil, Sitophilus zeamais. Chemosphere,Volume 69, Issue1, August 2007, Pages 17-24.

            Freitas R C P , Faroni, Lêda Rita D\"Antonino, Haddi K , et al. Allyl isothiocyanate actions on populations of Sitophilus zeamais resistant to phosphine: Toxicity, emergence inhibition and repellency[J]. Journal of Stored Products Research, 2016, 69:257-264.

            案(an)例(li)二(er)——大(da)豆夜蛾

            Angelica Plata-Rueda, Carlos Henrique Martins de Menezes, et al., Side-effects caused by chlorpyrifos in the velvetbean caterpillar Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae),Chemosphere,Volume 259,2020.

            大(da)豆夜蛾作為(wei)大(da)豆作物害(hai)蟲,主(zhu)要(yao)通(tong)過(guo)殺蟲劑(ji)防治(zhi)。本(ben)文評(ping)估(gu)了毒(du)死(si)蜱(pi)對大(da)豆夜蛾毒(du)性(xing)、存(cun)活率(lv)和副作用(yong)(運(yun)動行(xing)為(wei)、呼(hu)吸、食物消耗(hao)等(deng))的(de)影響(xiang)。毒(du)死(si)蜱(pi)(LC50=0.58 g L-1和LC90=0.85 g L-1)對(dui)大(da)豆夜蛾有毒(du)殺效(xiao)應(ying),並(bing)且LC50毒(du)死(si)蜱(pi)下(xia)存活率(lv)從對(dui)照(zhao)99%降(jiang)低到30%。殺蟲劑(ji)降(jiang)低了呼(hu)吸速率(lv)、食物消耗(hao)量(liang),改(gai)變了(le)行(xing)為(wei)反(fan)應(ying)以(yi)及(ji)中腸(chang)組(zu)織病變損傷(shang)。

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            類(lei)似的(de)研究(jiu)見Insecticidal activity of garlic essential oil and their constituents against the mealworm beetle, Tenebrio molitor Linnaeus (Coleoptera: Tenebrionidae). Sci Rep 7, 46406 (2017).

            案(an)例(li)三(san)——棉(mian)花(hua)粉蚧

            Singh S , Gupta M , Pandher S , et al. Using de novo transcriptome assembly and analysis to study RNAi in Phenacoccus solenopsisTinsley (Hemiptera: Pseudococcidae)[J]. Scientific Reports, 2019, 9(1).

            棉(mian)花(hua)粉蚧起源於北美(mei),2005年在印(yin)度(du)及(ji)巴基(ji)斯坦(tan)被(bei)發現,2010年快(kuai)速擴散到我(wo)國(guo)南方地(di)區(見農(nong)業(ye)部、國家林(lin)業(ye)局(ju)公(gong)告第1380號),對(dui)當(dang)地(di)棉花(hua)生產造成(cheng)嚴重(zhong)危(wei)害(hai)。

               傳(chuan)統的(de)合(he)成(cheng)殺蟲劑(ji)易(yi)造成環境(jing)汙染和害(hai)蟲耐(nai)藥(yao)性(xing)。文中通過(guo)RNAi對(dui)害蟲目(mu)標(biao)基(ji)因(yin)進行(xing)特(te)定序(xu)列調(tiao)節(jie),從而(er)導(dao)致(zhi)重(zhong)要(yao)生理(li)過(guo)程(cheng)功能喪(sang)失。生理(li)過(guo)程(cheng)功能監測采(cai)用SSI呼(hu)吸代(dai)謝(xie)測量(liang)技(ji)術定性(xing)評(ping)估(gu)害蟲體(ti)液(ye)損(sun)失,技術方案(an)中的(de)部分配(pei)置(zhi)如(ru)下(xia)圖:

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            (i)與(yu)GFP相比(bi),對(dui)dSRNA註射(she)(10μg)後AQP和CAL處(chu)理(li)的(de)粉(fen)蚧液(ye)體(ti)損(sun)失進行(xing)定量(liang)和定性(xing)估(gu)計(ji)。基於水(shui)敏(min)感(gan)紙(zhi)的(de)流(liu)體(ti)損(sun)失定性(xing)估(gu)計(ji),表明(ming)AQP和CAL中的(de)藍(lan)點(液(ye)體(ti)損(sun)失較少(shao))較少(shao):(A)dsAQP註射(she)(B)dsCAL註射(she)(C)dsGFP註入(ru)(ii) RH-300水(shui)蒸氣分析(xi)儀(yi),用於評(ping)估(gu)昆蟲的(de)液(ye)體(ti)損(sun)失。(三)與dsGFP相比(bi),dsAQP 註射(she)後粉(fen)蚧釋(shi)放的(de)定量(liang)液(ye)體(ti)排泄物。誤(wu)差條表(biao)示(shi)標(biao)準(zhun)偏差(n=4)和*表(biao)示(shi)顯著性(xing)(P=0.05)。作者(zhe)新(xin)研究(jiu)成果(guo)見(jian):Kaur R , Gupta M , Singh S , et al. Enhancing RNAi Efficiency to Decipher the Functional Response of Potential Genes in Bemisia tabaci AsiaII-1 (Gennadius) Through dsRNA Feeding Assays[J]. Frontiers in Physiology, 2020, 11.

            案(an)例(li)四(si)——甘蔗天牛(niu)

            Marion JavalSaskia ThomasPhilipp LehmannMadeleine G. BartonDesmond E. ConlongAnton Du Plessis, and John S. Terblanche. The Effect of Oxygen Limitation on a Xylophagous Insect’s Heat Tolerance Is Influenced by Life-Stage Through Variation in Aerobic Scope and Respiratory Anatomy. Front Physiol. 2019,10: 1426.

            天牛(niu)分布於我國(guo)大(da)部分地(di)區,幼(you)蟲蛀食枝幹皮層(ceng)、木質部,引起枯枝死樹,危(wei)害(hai)蘋(ping)果(guo)、桃、柿、棗(zao)、栗、楊、柳(liu)、油(you)桐(tong)等(deng)樹(shu)木(mu)。在氣候變化(hua)的(de)背(bei)景下(xia),昆蟲的(de)地(di)理(li)範(fan)圍變(bian)化(hua)與(yu)壹(yi)系列空間(jian)和時間(jian)尺(chi)度(du)的(de)氣候變異性密切相關(guan),害(hai)蟲尤其如(ru)此(ci)。出於這(zhe)些(xie)原(yuan)因(yin),熱(re)極限(xian)估(gu)計(ji)至關(guan)重(zhong)要(yao),代(dai)表(biao)了害蟲關鍵特性的(de)環境(jing)極(ji)限(xian),如(ru)熱(re)質生物的(de)活動、生存、發育和繁(fan)殖(zhi)。

              本(ben)文(wen)利(li)用SSI呼(hu)吸代(dai)謝(xie)測量(liang)技(ji)術探索了(le)天牛(niu)的(de)熱(re)耐(nai)受性與氧氣限制(zhi)之間(jian)的(de)潛(qian)在聯(lian)系。結(jie)果(guo)表(biao)明(ming),雖然幼(you)蟲和成(cheng)蟲在常(chang)氧下(xia)有類(lei)似的(de)臨(lin)界熱(re)大(da)值(CTmax),缺(que)氧下(xia)成蟲的(de)代(dai)謝(xie)率(lv)比(bi)幼(you)蟲更(geng)顯著地(di)降(jiang)低,從而(er)更(geng)顯著地(di)減(jian)少(shao)前(qian)者(zhe)的(de)有氧範(fan)圍。通(tong)過實(shi)驗操縱的(de)氧(yang)氣水(shui)平(ping)在不(bu)連(lian)續(xu)氣體(ti)交(jiao)換(huan)循(xun)環(DGC)和連(lian)續(xu)呼(hu)吸模式(shi)之間(jian)切換(huan)來表(biao)明(ming),成(cheng)蟲比(bi)幼(you)蟲更(geng)壹(yi)致(zhi)地(di)捍(han)衛氣管氧(yang)(臨界)設定點(dian)。這(zhe)些(xie)影響(xiang)可以解(jie)釋為(wei),呼(hu)吸解(jie)剖的(de)體(ti)積(ji)與(yu)成(cheng)蟲的(de)身(shen)體(ti)質(zhi)量(liang)呈(cheng)正(zheng)相關(guan),但(dan)在幼(you)蟲中明(ming)顯是(shi)大(da)小(xiao)不變(bian)的(de)。因(yin)此(ci)天牛(niu)的(de)兩(liang)個生命(ming)階(jie)段在呼(hu)吸結(jie)構(gou)和功(gong)能上表現出關(guan)鍵差異(yi),可以解(jie)釋缺(que)氧對上熱(re)極限(xian)的(de)影響(xiang)程(cheng)度(du)。

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            北(bei)京(jing)易(yi)科泰生態技術公司(si)提供(gong)植(zhi)物病(bing)蟲害研究(jiu)檢(jian)測全面技(ji)術方案(an):

            ü害(hai)蟲能量(liang)代(dai)謝(xie)生理(li)生態研究(jiu)測量(liang)技(ji)術

            ü農(nong)業(ye)、森(sen)林(lin)病(bing)蟲害無(wu)人(ren)機遙(yao)感(gan)技(ji)術

            üXRF元(yuan)素(su)掃(sao)描分析(xi)

            ü病(bing)蟲害高(gao)光(guang)譜(pu)成像(xiang)檢(jian)測技(ji)術

            ü病(bing)蟲害多(duo)光(guang)譜(pu)熒(ying)光(guang)檢(jian)測技(ji)術

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