FKM多(duo)光(guang)譜熒(ying)光(guang)動(dong)態顯微(wei)成像系統是(shi)目(mu)前(qian)功能(neng)強(qiang)大全(quan)面的(de)植(zhi)物(wu)顯微(wei)熒(ying)光(guang)研究儀(yi)器，是(shi)基(ji)於(yu)FluorCam葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)成像技術(shu)的(de)顯微(wei)成像定(ding)制(zhi)系(xi)統(tong)。它(ta)由(you)包含可擴展(zhan)部(bu)件(jian)的(de)增(zeng)強(qiang)顯微(wei)鏡(jing)、高分辨(bian)率(lv)CCD相(xiang)機(ji)、激(ji)發(fa)光(guang)源組(zu)、光(guang)譜儀(yi)、控溫(wen)模塊以及相應(ying)的(de)控(kong)制(zhi)單(dan)元(yuan)和的(de)工(gong)作站與分(fen)析軟(ruan)件(jian)組(zu)成。它(ta)不(bu)僅(jin)可以進(jin)行(xing)微(wei)藻(zao)、單(dan)個(ge)細胞、單(dan)個(ge)葉(ye)綠(lv)體乃至基(ji)粒(li)-基(ji)質類(lei)囊體片段進(jin)行(xing)Fv/Fm、Kautsky誘(you)導效(xiao)應(ying)、熒(ying)光(guang)淬(cui)滅、OJIP快(kuai)速(su)熒(ying)光(guang)響(xiang)應(ying)曲線、QA再氧(yang)化(hua)等各種(zhong)葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)及MCF多(duo)光(guang)譜熒(ying)光(guang)（multicolor fluorescence）成像分析；還能(neng)通過激(ji)發(fa)光(guang)源組(zu)進(jin)行(xing)進(jin)行(xing)任(ren)意熒(ying)光(guang)激發(fa)和熒(ying)光(guang)釋放(fang)波段的(de)測(ce)量(liang)，從(cong)而進(jin)行(xing)GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等(deng)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)、熒(ying)光(guang)染(ran)料以及藻青蛋(dan)白(bai)、藻(zao)紅(hong)蛋(dan)白(bai)、藻(zao)膽素等藻類(lei)*熒(ying)光(guang)色素的(de)成像分析；更(geng)可以利(li)用(yong)光(guang)譜儀(yi)對各種(zhong)熒(ying)光(guang)進(jin)行(xing)光(guang)譜分(fen)析(xi)，區(qu)分各發色團（例如PSI和PSII及各種(zhong)捕光(guang)色素復合(he)體等）並進(jin)行(xing)深(shen)入(ru)分(fen)析(xi)。

  FKM多(duo)光(guang)譜熒(ying)光(guang)動(dong)態顯微(wei)成像系統使熒(ying)光(guang)成像技術(shu)真(zhen)正(zheng)成為(wei)光(guang)合作用機(ji)理(li)研究的(de)探(tan)針，使科研工(gong)作者(zhe)在(zai)藻(zao)類(lei)和高等植(zhi)物(wu)細胞與亞(ya)細胞層次(ci)深入(ru)理(li)解光(guang)合作用過程(cheng)及該(gai)過(guo)程(cheng)中發(fa)生的(de)各種(zhong)變(bian)化(hua)，為(wei)直接研究葉(ye)綠(lv)體中光(guang)合系(xi)統(tong)的(de)工(gong)作機(ji)理(li)提(ti)供了為(wei)有力(li)的(de)工(gong)具。FKM作為(wei)藻類(lei)/植(zhi)物(wu)表(biao)型和基(ji)因型(xing)顯微(wei)研究的(de)雙(shuang)重利(li)器，得(de)到(dao)了學(xue)界(jie)的(de)廣(guang)泛認可並取(qu)得(de)了大(da)量(liang)的(de)科研成果。

功能(neng)特(te)點(dian)

•內置現今(jin)葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)研究的(de)全(quan)部程(cheng)序(xu)，如Fv/Fm、Kautsky誘(you)導效(xiao)應(ying)、熒(ying)光(guang)淬(cui)滅、OJIP快(kuai)速(su)熒(ying)光(guang)響(xiang)應(ying)曲線、QA再氧(yang)化(hua)等，可獲得(de)70余(yu)項(xiang)參數(shu)。

•配備10倍(bei)、20倍(bei)、40倍(bei)、63倍(bei)和100倍(bei)生物(wu)熒(ying)光(guang)物(wu)鏡(jing)，可以清(qing)晰觀(guan)測到(dao)葉(ye)綠(lv)體及其發出的(de)熒(ying)光(guang)。

•激發光(guang)源組(zu)中包括紅(hong)外光(guang)、紅(hong)光(guang)、藍光(guang)、綠光(guang)、白(bai)光(guang)、紫(zi)外光(guang)和遠(yuan)紅(hong)光(guang)等，通過紅(hong)藍綠三色光(guang)還可以調(tiao)出(chu)可見光(guang)譜中的(de)任(ren)何(he)壹(yi)種(zhong)色光(guang)，能(neng)夠研究植(zhi)物(wu)/藻(zao)類(lei)中任(ren)何(he)壹(yi)種(zhong)色素分子或(huo)發(fa)色團。

•可進(jin)行(xing)GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等(deng)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)、熒(ying)光(guang)染(ran)料的(de)成像分析

•高分辨(bian)率(lv)光(guang)譜儀(yi)能(neng)夠深入(ru)解析(xi)各種(zhong)熒(ying)光(guang)的(de)光(guang)譜圖(tu)。

•控溫系統(tong)可以保證實(shi)驗(yan)樣(yang)品在(zai)同等(deng)溫(wen)度(du)條件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)測(ce)量(liang)，提(ti)高實驗(yan)精度(du)，也(ye)可以進(jin)行(xing)高溫/低(di)溫脅(xie)迫(po)研究。

應用領域

• 微藻、大型(xing)藻(zao)類(lei)/高等植(zhi)物(wu)的(de)單(dan)個(ge)細胞、單(dan)個(ge)葉(ye)綠(lv)體、基(ji)粒(li)-基(ji)質類(lei)囊體片段等的(de)顯微(wei)結(jie)構(gou)植(zhi)物(wu)光(guang)合生(sheng)理(li)研究

• 藻類(lei)/植(zhi)物(wu)逆(ni)境(jing)研究

• 生物(wu)和非生物(wu)脅(xie)迫(po)的(de)研究

• 藻類(lei)/植(zhi)物(wu)抗(kang)脅(xie)迫(po)能(neng)力(li)及易感(gan)性(xing)研究

• 突(tu)變(bian)體篩(shai)選及光(guang)合機(ji)理(li)研究

• 藻類(lei)長勢與(yu)產(chan)量(liang)評(ping)估(gu)

• 藻類(lei)*色素與光(guang)合作用關系(xi)

• 藻類(lei)/植(zhi)物(wu)——微(wei)生(sheng)物(wu)交(jiao)互(hu)作用研究

• 藻類(lei)/植(zhi)物(wu)——原(yuan)生(sheng)動(dong)物(wu)交(jiao)互(hu)作用研究

• 基(ji)因工(gong)程與(yu)分(fen)子生物(wu)學(xue)研究

測量(liang)樣(yang)品(pin)

• 植(zhi)物(wu)活(huo)體切片

• 植(zhi)物(wu)表(biao)皮

• 植(zhi)物(wu)細胞

• 綠藻、藍藻(zao)等(deng)各種(zhong)單(dan)細胞和多(duo)細胞微藻(zao)

• 葉(ye)綠(lv)體提(ti)取液(ye)

• 類(lei)囊體提(ti)取液(ye)

• 含有葉(ye)綠(lv)體的(de)原(yuan)生動(dong)物(wu)

工(gong)作原理(li)

  FKM分析過程(cheng)中，通過連接在顯微(wei)鏡(jing)上(shang)的(de)激(ji)發光(guang)源組(zu)和內(nei)置(zhi)在6位濾波輪(lun)中的(de)壹(yi)系列(lie)濾波器、分(fen)光(guang)鏡激(ji)發(fa)植(zhi)物(wu)樣(yang)品(pin)中各種(zhong)發(fa)色團的(de)動(dong)態熒(ying)光(guang)。樣品(pin)激(ji)發(fa)出的(de)熒(ying)光(guang)經(jing)顯微(wei)鏡(jing)放(fang)大(da)後進(jin)行(xing)熒(ying)光(guang)光(guang)譜分(fen)析(xi)和熒(ying)光(guang)動(dong)力(li)學(xue)成像分析。SM 9000光(guang)譜儀(yi)通過光(guang)纖與(yu)顯微(wei)鏡(jing)連接，以進(jin)行(xing)激(ji)發(fa)熒(ying)光(guang)光(guang)譜分(fen)析(xi)。安(an)裝(zhuang)在顯微(wei)鏡(jing)頂(ding)部(bu)的(de)高分辨(bian)率(lv)CCD相(xiang)機(ji)則(ze)用於(yu)熒(ying)光(guang)動(dong)力(li)學(xue)成像分析。全(quan)部工(gong)作過程通過工(gong)作站和控(kong)制(zhi)單(dan)元(yuan)按照(zhao)預(yu)先設(she)定(ding)好的(de)程(cheng)序(xu)自(zi)動(dong)進(jin)行(xing)。測(ce)量(liang)過(guo)程(cheng)中，可通過溫(wen)控(kong)模塊調控藻類(lei)、植(zhi)物(wu)細胞等實(shi)驗(yan)樣(yang)品的(de)溫(wen)度(du)。蠕動(dong)泵可以實(shi)現培(pei)養(yang)藻類(lei)的(de)連續測量(liang)。

儀(yi)器組(zu)成

1. 增強(qiang)顯微(wei)鏡(jing) 

2. 高分辨(bian)率(lv)CCD相(xiang)機(ji) 

3. 激發光(guang)源組(zu) 

4. SM 9000光(guang)譜儀(yi) 

5. 主控制(zhi)單(dan)元(yuan) 

6. 工(gong)作站及軟(ruan)件(jian) 

7. 控溫模塊的(de)控(kong)制(zhi)單(dan)元(yuan)

8. 6位濾波輪(lun)

技術(shu)參數(shu)

• 測量(liang)參數(shu)

Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多(duo)個葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)參數(shu)，每(mei)個(ge)參數(shu)均(jun)可顯示(shi)2維(wei)熒(ying)光(guang)彩(cai)色圖像

OJIP快(kuai)速(su)熒(ying)光(guang)曲線：測定(ding)分析(xi)OJIP曲線與二(er)十幾(ji)項(xiang)相(xiang)關參數(shu)包括：Fo、Fj、Fi、P或(huo)Fm、Vj、Vi、Mo、Area 、Fix Area、Sm 、Ss 、N（QA還原周轉數量(liang)）、Phi¬¬¬_Po 、Psi_o 、Phi_Eo、Phi_Do、Phi_pav、ABS/RC（單(dan)位反(fan)應中心的(de)吸收光(guang)量(liang)子通量(liang)）、TRo/RC（單(dan)位反(fan)應中心初(chu)始(shi)捕獲光(guang)量(liang)子通量(liang)）、ETo/RC（單(dan)位反(fan)應中心初(chu)始(shi)電子傳(chuan)遞光(guang)量(liang)子通量(liang)）、DIo/RC（單(dan)位反(fan)應中心能(neng)量(liang)散(san)失(shi)）、ABS/CS（單(dan)位樣(yang)品截面的(de)吸收光(guang)量(liang)子通量(liang)）、TRo/CSo、RC/CSx（反(fan)應(ying)中心密度(du)）、PIABS（基(ji)於(yu)吸收光(guang)量(liang)子通量(liang)的(de)“性(xing)能(neng)”指數或(huo)稱生存(cun)指數）、PIcs（基(ji)於(yu)截面的(de)“性(xing)能(neng)”指數或(huo)稱生存(cun)指數）等(deng)（選配）

GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)和熒(ying)光(guang)染(ran)料的(de)成像分析（選配(pei)）

QA再氧化動(dong)力(li)學(xue)曲線（選配(pei)）

Spectrum熒(ying)光(guang)光(guang)譜圖(tu)（選(xuan)配(pei)）

•具備完備的(de)自(zi)動(dong)測量(liang)程(cheng)序(xu)（protocol），可自由(you)對自(zi)動(dong)測量(liang)程(cheng)序(xu)進(jin)行(xing)編(bian)輯(ji)

Fv/Fm：測量(liang)參數(shu)包括Fo，Fm，Fv，QY等

Kautsky誘(you)導效(xiao)應(ying)：Fo，Fp，Fv，Ft_Lss，QY，Rfd等(deng)熒(ying)光(guang)參數(shu)

熒(ying)光(guang)淬(cui)滅分(fen)析(xi)：Fo，Fm，Fp，Fs，Fv，QY，ΦII，NPQ，Qp，Rfd，qL等50多(duo)個參數(shu)，2套(tao)制(zhi)式(shi)程(cheng)序(xu)

光(guang)響(xiang)應(ying)曲線LC：Fo，Fm，QY，QY_Ln，ETR等熒(ying)光(guang)參數(shu)

Dyes & FPs穩態熒(ying)光(guang)成像測量(liang)

OJIP快(kuai)速(su)熒(ying)光(guang)動(dong)力(li)學(xue)分析(xi)：Mo（OJIP曲線初(chu)始(shi)斜率(lv)）、OJIP固(gu)定(ding)面積(ji)、Sm（對關(guan)閉(bi)所(suo)有光(guang)反應(ying)中心所需(xu)能(neng)量(liang)的(de)量(liang)度(du)）、QY、PI等26個(ge)參數(shu)（選(xuan)配）

QA再氧化動(dong)力(li)學(xue)（選配(pei)）

Spectrum熒(ying)光(guang)光(guang)譜分(fen)析(xi)（選(xuan)配）

•熒(ying)光(guang)激發(fa)光(guang)源：紅(hong)外光(guang)、紅(hong)光(guang)、橙光(guang)、藍光(guang)、綠光(guang)、白(bai)光(guang)、紫(zi)外光(guang)等可選，根據客戶要求定(ding)制(zhi)光(guang)源組(zu)

•透(tou)射(she)光(guang)源（選(xuan)配(pei)）：白(bai)光(guang)、遠紅(hong)光(guang)

高分辨(bian)率(lv)TOMI-2 CCD傳(chuan)感(gan)器：

逐(zhu)行(xing)掃(sao)描(miao)CCD

高圖像分辨率(lv)：1360×1024像素

時間(jian)分(fen)辨(bian)率(lv)：在(zai)高圖像分辨率(lv)下(xia)可達每(mei)秒(miao)20幀(zhen)

A/D 轉換分辨率(lv)：16位（65536灰度(du)色階）

像元(yuan)尺寸(cun)：6.45µm×6.45µm

運(yun)行(xing)模式：1）動(dong)態視(shi)頻(pin)模式，用(yong)於(yu)葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)參數(shu)測(ce)量(liang)；2）快(kuai)照(zhao)模式，用(yong)於(yu)GFP等熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)和熒(ying)光(guang)染(ran)料測量(liang)

通訊模式：千(qian)兆以(yi)太網

•顯微(wei)鏡(jing)：Axio Imager M2，可選配(pei)Axio Scope A1簡潔(jie)版或(huo)Axio Imager Z2高級(ji)版

物(wu)鏡(jing)轉盤：研究級(ji)7孔自動(dong)物(wu)鏡(jing)轉盤

透(tou)射(she)光(guang)快(kuai)門(men)

聚(ju)光(guang)器 Achr Apl 0.9 H

6位反(fan)光(guang)鏡轉盤

雙目鏡筒(100:0/30:70/0:100)

機(ji)械(xie)載物(wu)臺：75×50mm，硬膜陽(yang)極(ji)氧化(hua)表(biao)面

樣品架(jia)：76×26mm

•物(wu)鏡(jing)：10倍(bei)、20倍(bei)、40倍(bei)、63倍(bei)和100倍(bei)生物(wu)熒(ying)光(guang)物(wu)鏡(jing)（可選）

•6位濾波輪(lun)：葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)、GFP/SYTOX、DAPI/CTC等

•SM9000光(guang)譜儀(yi)

入(ru)射(she)狹(xia)縫(feng)：70µm×1400µm 

光(guang)柵：平(ping)場(chang)型(xing)校(xiao)正(zheng)

光(guang)譜範圍(wei)：200-980nm

波長精確(que)度(du)：<0.5nm

再現性(xing)：<0.1nm

溫度(du)漂移：<0.01nm/K

•溫度(du)調控(kong)模塊：溫度(du)調節範圍(wei) 5℃-70℃，精確(que)度(du)0.1℃

•蠕動(dong)泵（選(xuan)配）：流速(su)10-5600µl/min，用於(yu)藻類(lei)連續培(pei)養(yang)測量(liang)

•FluorCam葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)成像分析軟(ruan)件(jian)功能(neng)：具Live（實況(kuang)測試）、Protocols（實驗(yan)程(cheng)序(xu)選(xuan)擇定(ding)制(zhi)）、Pre–processing（成像預處(chu)理(li)）、Result（成像分析結果）等(deng)功能(neng)菜(cai)單(dan)

•客戶定(ding)制(zhi)實(shi)驗(yan)程(cheng)序(xu)協(xie)議(yi)（protocols）：可設(she)定(ding)時間(jian)（如測量(liang)光(guang)持續時間(jian)、光(guang)化學(xue)光(guang)持續時間(jian)、測(ce)量(liang)時(shi)間(jian)等(deng)）、光(guang)強(qiang)（如不(bu)同(tong)光(guang)質光(guang)化學(xue)光(guang)強(qiang)度(du)、飽和光(guang)閃強(qiang)度(du)、調制(zhi)測(ce)量(liang)光(guang)等），具(ju)備實驗(yan)程(cheng)序(xu)語(yu)言和腳(jiao)本(ben)，用戶也(ye)可利(li)用(yong)Protocol菜(cai)單(dan)中的(de)向導程(cheng)序(xu)模版自(zi)由(you)創建(jian)新的(de)實(shi)驗(yan)程(cheng)序(xu)

•自動(dong)測量(liang)分(fen)析(xi)功能(neng)：可設(she)置壹個(ge)實驗(yan)程(cheng)序(xu)（Protocol）自(zi)動(dong)無人(ren)值守(shou)循環(huan)成像測量(liang)，重(zhong)復次(ci)數及間(jian)隔時間(jian)客戶自定(ding)義(yi)，成像測量(liang)數(shu)據(ju)自(zi)動(dong)按時(shi)間(jian)日期(qi)存(cun)入(ru)計(ji)算機(ji)（帶(dai)時間(jian)戳）

•快(kuai)照(zhao)（snapshot）模式：通過快(kuai)照(zhao)成像模式，可以自(zi)由(you)調節光(guang)強(qiang)、快(kuai)門(men)時間(jian)及靈(ling)敏(min)度(du)得到(dao)清(qing)晰突(tu)出(chu)的(de)植(zhi)物(wu)樣(yang)本(ben)穩(wen)態熒(ying)光(guang)和瞬(shun)時(shi)熒(ying)光(guang)圖片

•成像預處(chu)理(li)：程(cheng)序(xu)軟(ruan)件(jian)可自動(dong)識別多(duo)個植(zhi)物(wu)樣(yang)品(pin)或(huo)多(duo)個區(qu)域，也(ye)可手動(dong)選擇(ze)區域（Region of interest，ROI）。手動(dong)選區(qu)的(de)形狀(zhuang)可以是(shi)方(fang)形、圓(yuan)形、任(ren)意多(duo)邊形或(huo)扇形。軟(ruan)件(jian)可自動(dong)測量(liang)分(fen)析(xi)每(mei)個(ge)樣(yang)品和選(xuan)定(ding)區域的(de)熒(ying)光(guang)動(dong)力(li)學(xue)曲線及相應(ying)參數(shu)，樣(yang)品或(huo)區(qu)域數(shu)量(liang)不(bu)受(shou)限制(zhi)（>1000）

•數據分析(xi)模式：具(ju)備“信號(hao)計(ji)算再平均(jun)”模式（算數平均(jun)值(zhi)）和“信(xin)號(hao)平均(jun)再(zai)計(ji)算”模式，在(zai)高信噪(zao)比(bi)的(de)情(qing)況下選用(yong)“信(xin)號(hao)計(ji)算再平均(jun)”模式，在(zai)低(di)信噪(zao)比(bi)的(de)情(qing)況下選擇(ze)“信(xin)號(hao)平均(jun)再(zai)計(ji)算”模式以(yi)過濾掉噪(zao)音帶(dai)來(lai)的(de)誤差

•輸(shu)出結(jie)果：高時間(jian)解析(xi)度(du)熒(ying)光(guang)動(dong)態圖、熒(ying)光(guang)動(dong)態變化(hua)視(shi)頻(pin)、熒(ying)光(guang)參數(shu)Excel文(wen)件、直方(fang)圖(tu)、不(bu)同(tong)參數(shu)成像圖、不(bu)同(tong)ROI的(de)熒(ying)光(guang)參數(shu)列(lie)表(biao)等

葉(ye)綠(lv)素熒(ying)光(guang)與光(guang)譜分(fen)析(xi)結(jie)果

典(dian)型(xing)應用：

產(chan)地：捷(jie)克(ke)

參考(kao)文(wen)獻(xian)：

1.Küpper H, et al. 2019. Analysis of OJIP Chlorophyll Fluorescence Kinetics and QA Reoxidation Kinetics by Direct Fast Imaging. Plant Physiology 179: 369-381

2.Konert G, et al. 2019. Protein arrangement factor: a new photosynthetic parameter characterizing the organization of thylakoid membrane proteins. Physiologia Plantarum 166: 264-277.

3.Exposito-Rodriguez M, et al. 2017. Photosynthesis-dependent H2O2 transfer from chloroplasts to nuclei provides a high-light signalling mechanism. Nature Communications, 8: 49

4.Higo S, et al. 2017. Application of a pulse-amplitude-modulation (PAM) fluorometer reveals its usefulness and robustness in the prediction of Karenia mikimotoi blooms: A case study in Sasebo Bay, Nagasaki, Japan. Harmful Algae, 61:63-70

5.Jacobs M, et al. 2016. Photonic multilayer structure of Begonia chloroplasts enhances photosynthetic efficiency. Nature Plants, doi:10.1038/nplants.2016.162

6.Andresen E, et al. 2016. Cadmium toxicity investigated at the physiological and biophysical levels under environmentally relevant conditions using the aquatic model plant Ceratophyllum demersum. New Phytol., 210(4):1244-1258

7.Thomas G, et al. 2016. Deficiency and toxicity of nanomolar copper in low irradiance—A physiological and metalloproteomic study in the aquatic plant Ceratophyllum demersum. Aquatic Toxicology, 177:226-236

8.Fujise L, et al. 2014. Moderate Thermal Stress Causes Active and Immediate Expulsion of Photosynthetically Damaged Zooxanthellae (Symbiodinium) from Corals. PLOS ONE,  DOI:10.1371/journal.pone.0114321

9.Gorecka M, et al. 2014. Abscisic acid signalling determines susceptibility of bundle sheath cells to photoinhibition in high light-exposed Arabidopsis leaves. Philosophical Transactions of the Royal Society B, 369(1640), DOI: 10.1098/rstb.2013.0234

10.Mishra S, et al. 2014. A different sequence of events than previously reported leads to arsenic-induced damage in Ceratophyllum demersum L. Metallomics, 6: 444-454

11.Ferimazova N, et al. 2013. Regulation of photosynthesis during heterocyst differentiation in Anabaena sp. strain PCC 7120 investigated in vivo at single-cell level by chlorophyll fluorescence kinetic microscopy. Photosynthesis Research, 116(1): 79-91

12.Andresen E, et al. 2013. Effects of Cd & Ni toxicity to Ceratophyllum demersum under environmentally relevant conditions in soft & hard water including a German lake. Aquatic Toxicology. 142–143, 15: 387–402